期刊简介
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首页>中国医疗前沿杂志
- 杂志名称：中国医疗前沿杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医院协会
- 国际刊号：1673-5552
- 国内刊号：11-5483/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中)
人成熟转化生长因子β1蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
张建军；王东洋；齐共建；曾令宇；徐开林
关键词：转化生长因子β1(TGF-β1), 原核表达, 重组蛋白, 分离和提纯
摘要：目的 构建人成熟转化生长因子β1(hmTGF-β1)的原核表达载体,表达并纯化hmTGF-β1蛋白.方法 应用RTPCR方法 获得hmTGF-β1基因,连接至自带6His标签表达载体pET23b,构建原核表达质粒pET23b-hmTGF-β1,诱导表达hmTGF-β1融合蛋白,镍亲合层析法纯化融合蛋白,并对纯化产物进行纯度分析.结果 成功构建了hmTGF-β1原核表达质粒pET23b-hmTGF-β1,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳分析,在约15kD处出现了一条新的蛋白条带,Western Blot结果显示该条带能够与His抗体特异性结合.应用Ni-NTA亲和层析法纯化目的 蛋白,分析纯度达95%.结论 成功构建了hmTGF-β1蛋白的原核表达质粒,并成功表达与纯化hmTGF-β1蛋白,为进一步复性、获得有活性的hmTGF-β1打下基础.
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