白藜芦醇通过ERK1/2通路对H9c2心肌细胞抗氧化应激损伤的研究

摘要：目的 培养H9c2心肌细胞建立氧化应激模型,同时选择并选用ERK1/2途径作为研究对象,利用ERK1/2通路特异性阻断剂UO126进一步探讨可能的作用机制,观测白藜芦醇对心肌细胞抗氧化应激损伤的保护及机制.方法 通过传代方法培养心肌细胞细胞.实验分为以下5组:正常对照组、过氧化氢(H2O2)组、白藜芦醇+H2O2组、白藜芦醇+UO126+H2O2组、UO126+H2O2组.实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态的变化,测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放,测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性,通过流式细胞术来检测心肌细胞的凋亡.结果 H2O2组心肌细胞LDH量较对照组有所增加(998.08±23.07 Vs 477.11±17.78,P<0.05),SOD活性较对照组有所下降(15.43±4.52vs35.03±2.17,P<0.05);白藜芦醇+H2O2组LDH的量较H2O2组下降(708.51±17.84Vs998.08±23.07,P<0.05),SOD的量较H2O2组下降(29.03±3.18Vs15.43±4.52,p<0.05);而白藜芦醇+UO126+H2O2组与白藜芦醇+H2O2组相比LDH的量有所下降(617.3±11.23Vs708.51±17.84,P<0.05),SOD的量有所下降(25.12±2.23Vs29.03±3.18,P<0.05),UO126+H2O2组与H2O2组比较差异有统计学意义,p<0.05.凋亡率结果显示,空白组细胞生长良好,对照组细胞集中在B3区,在B4区和B2区内无分布或分布甚少,凋亡率极低为6.73±2.38;H2O2组出现大量凋亡细胞,其凋亡率为56.2±4.73,与空白对照组相比差别有统计学意义(p<0.05);白藜芦醇+H2O2组其凋亡率显著降低为48.17±3.08,与H2O2组相比差别有统计学意义(P<0.05);而白藜芦醇+UO126+H2O2组与白藜芦醇+H2O2组相比凋亡率有所下降(48.17±3.08Vs40.9±1.66,p<0.05),差别均有统计学意义.结论 H2O2可以诱导心肌细胞的损伤及凋亡;白藜芦醇可以减轻H2O2所致的心肌细胞损伤及凋亡作用,ERK1/2通路可能为白藜芦醇发挥保护作用的途径之一.